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奥林巴斯暗场显微镜故障排除

时间:2020-03-19浏览数:447

问题:
照明不足以使样品可见,或者样品可见但非常暗淡。
解决:灯泡电压可能设置得太低,或者灯泡强度不足以正确照亮样品。将电压升至较大约12V(对于12V,100W卤素灯泡),或者在可能的情况下用更大的强度更换光源。如果这样不能解决问题,请检查底下聚光镜,以确保其位置正确,并且具有合适尺寸的视场光阑。另外,请检查彩色和/或中性密度滤光片,偏光片,延迟片或可能降低照明强度的任何其他组件的光路。 
如果反射聚光镜的数值孔径较高时出现此问题,请检查以确保聚光镜**部镜头正确涂油到显微镜载玻片的底部。如果浸入式接触已损坏,重新涂抹油并架起聚光镜,直到**部镜片完全浸入油中并接触到载玻片的底部。
问题:
视场在中心有一个黑点,降低了照度,但周边的物体照得很好,看起来很正常。
解决:子系统聚光镜的位置不正确,或者光圈对于物镜尺寸不合适。在观察视野中的标本时小心地上下放置聚光镜。检查以确保聚光器光圈和场光阑都设置在大开位置。如果这不影响照明,请改变视场光阑尺寸,使其稍大或稍小,然后重新检查照明。 
当使用厚度过大(大于标准毫米)的显微镜载玻片时,偶尔会出现这个问题。使用千分尺或一组拨号卡尺来确定载玻片和载玻片/盖玻片组合的厚度。如果载玻片太厚,或者换成正确厚度的载玻片或者检查聚光镜,以确定是否可以调节以补偿不同厚度的载玻片。
问题:
灯泡的使用寿命很短,灯泡内部用黑色蒸发钨涂层烧结。
解决:灯泡长时间使用电压过高,这**会缩短使用寿命。样品观察和/或显微摄影后,更换灯泡并降低灯泡电压。
问题:
图像的中心有明暗区域,有或没有暗区。
解决:当子系统聚光镜未正确居中或视场光阑太小时,此问题很常见。恢复明场并重新建立科勒照明条件,然后重复暗场过程,确保聚光镜居中。如果这没有帮助,则增加视场光阑的大小,直到建立适当的暗场条件。 
当使用暗场聚光镜的数值孔径太高的物镜时,也可能出现此问题。如果物镜内部有一个虹膜光阑,请减小虹膜开口尺寸,以确定是否有太多的斜光照射进入物镜的前透镜。此外,它可能有助于增加视场光阑的大小或改变为更高数值孔径的反射暗场聚光镜。
问题:
视场的外围仅在一侧明亮。
解决:检查物镜转盘以确保物镜正确定位在显微镜的光轴上。当物镜被正确定位时,有一个制动器停止,应该产生一个积极的“咔哒”声。如果场停止不正确居中,也可能出现问题。取下目镜并将相位望远镜放入眼管(或使用Bertrand镜头),然后使用对中螺丝正确对准视场光阑。
问题:
标本的图像不清晰,缺乏足够的对比度和细节。
解决:样品可能不适合暗场显微镜。许多染色的标本不能散射足够的光线,以便在暗场条件下清晰地成像。试样厚度也可能是一个问题,因为非常薄的试样通常不能很好地用暗场聚光镜发射的倾斜光线成像。更改为明场,相差,DIC或霍夫曼,以确定这是否改善标本对比度。
问题:
明亮的焦点区域阻碍了暗场标本的观察和/或显微摄影。
解决:这可能是由于聚光镜上方某处光学表面的灰尘,毛发,纤维和/或污垢污染。用光学组织或棉花彻底清洁载玻片。偶尔,由于物镜前镜头上的污染而出现此问题。小心地将物镜从物镜转盘中的座位上松开,然后慢慢转动,同时通过目镜观察标本。如果障碍物随物镜旋转,则可能是前镜头上的灰尘。轻轻地呼气,取下物镜并弄湿前镜片,然后用镜头纸或包裹在长木杆上的棉签清洁。更换物镜并检查确定阻塞已被完全清除。
问题:
背景均匀照明,但不是完全黑暗或呈现灰色。
解决:当不透明的字段停止对于物镜太小时,通常会发生此问题。使用相差望远镜或在光路中没有标本的Bertrand透镜,取下目镜并观察物镜的后焦平面。整个后焦面应该是黑暗的,周边没有任何明亮的光线。如果在物镜的后焦平面上观察到弧光或圆弧,请改为稍大的视场光阑。此外,减小视场光阑的大小将有助于抑制眩光并产生黑色背景(注意不要太多关闭此光阑孔径光阑)。
问题:
灯电容器的图像部分填满视场,模糊了标本的细节。
解决:滑片可能太薄或聚光镜可能调整得太高。测量显微镜载玻片的厚度并检查以确保油接触不被破坏。如果遇到困难,请保持载玻片底部上油,请尝试使用更厚的载玻片。
问题:
颜色出现在背景中,或背景不均匀,灰色阴影。
解决:整个安装座非常厚或者在安装介质中捕获到太多光散射污染伪影时,通常会出现此问题。关闭视场光阑并旋转载玻片以找到较佳方位,然后确定问题是否已得到纠正。试样可能需要重新安装在较薄的安装座上,或者安装介质可能需要过滤。用软镜头纸或棉签仔细清洁整个显微镜载玻片和盖玻片。
问题:
在水中观察水生生物时,样本会不断向一个方向漂移,使观察和显微摄影变得困难。
解决:由于盖玻片边缘的蒸发缓慢,正在产生对流。在盖玻片周围放一块凡士林或Cytoseal固定介质,将其牢固地密封在显微镜载玻片上。商业产品可以添加到水中以减缓这些微生物的移动,使它们更容易拍摄。
问题:
通过10倍物镜观察样品时,视野*有一个椭圆形的光点。
解决:灯泡聚光器可能会被错误地聚焦,或者扩散滤光片可能会丢失,从而导致出现在视场中的灯丝图像。重新聚焦聚光镜,确保光路中有扩散滤光片。
问题:
视场有明亮的斑点,并且存在实现样本尖锐焦点的问题。
解决:小气泡可能会被困在聚光镜**部和显微镜载玻片底部之间的油中。取下目镜(或插入Bertrand镜头)观察物镜的后焦面,气泡可见。为了补救,打破油接触,并用棉签清除任何残留的气泡。清洗聚光镜前镜和显微镜载玻片上的多余油,然后在镜头上涂抹一滴干净的油。如果问题仍然存在,请在重新涂抹机油之前彻底清洁所有光学表面。
问题:
在高放大倍率下,胶体颗粒显示不完整的牛顿环,看起来不均匀照射。
解决:聚光镜可能偏离中心。切换到较低的倍率物镜并重新调整聚光镜的中心。仔细检查以确定高倍率物镜是否具有不同的中心,如果是,则将物镜置于显微镜光轴上。

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